La cromatografía en columna es una técnica utilizada para separar y purificar componentes individuales de una mezcla. El aparato necesario para la cromatografía en columna suele incluir:
1. Columna de cromatografía
Un tubo de vidrio o plástico que sirve como componente principal donde ocurre la separación.
La columna está rellena con una fase estacionaria (p. ej., gel de sílice, alúmina) que adsorbe los componentes de la mezcla.
2. Fase estacionaria
Para llenar la columna se utiliza un material sólido como gel de sílice o alúmina.
La elección de la fase estacionaria depende de la polaridad de las sustancias a separar.
3. Fase móvil (eluyente)
Un líquido o gas que se mueve a través de la fase estacionaria y transporta la mezcla de muestra.
La elección del disolvente depende de las propiedades de la mezcla que se separa y de la fase estacionaria.
4. Depósito o embudo
Ubicado en la parte superior de la columna para contener y entregar la fase móvil a la columna de manera controlada.
5. Sistema de aplicación de muestra
Se utiliza una pipeta o jeringa para aplicar la mezcla en la parte superior de la fase estacionaria empaquetada.
6. Buque de recolección
Se utilizan recipientes o tubos de ensayo para recoger los componentes separados (fracciones) a la salida de la columna.
7. Sistema de entrega de eluyente
Gravedad: depende de la gravedad para arrastrar la fase móvil a través de la columna.
Bomba: Para caudales más rápidos o más controlados, particularmente en cromatografía en columna de alta presión.
8. Llave de paso o válvula
Un dispositivo en la parte inferior de la columna para controlar el caudal de la fase móvil.
9. Soporte y abrazaderas
Se utiliza para mantener la columna vertical y estable durante el experimento.
Equipo opcional:
Lámpara UV o detector: Para visualizar los componentes separados, especialmente si están coloreados o son activos contra los rayos UV.
Manto calefactor o baño de agua: Para control de temperatura si es necesario.
Placas de cromatografía de capa fina (TLC): A veces se utiliza para monitorear el progreso de la separación.
La combinación de estos componentes permite una separación y análisis eficientes de mezclas complejas en investigaciones químicas y biológicas.